許多高溫DNA聚合酶，如Taq DNA聚合酶、Tth DNA聚合酶等擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物在3’-末端后都帶有一個(gè)突出的堿基"A"，這樣的PCR產(chǎn)物可以用3’-末端后帶有一個(gè)突出堿基"T"的載體方便地進(jìn)行克隆。pBLUE-T 載體來(lái)源于pBlueScript II SK(+) 質(zhì)粒，在EcoRI酶切位點(diǎn)處添加了適當(dāng)序列，經(jīng)Xcm I 酶切后其3’末端直接產(chǎn)生未配對(duì)的"T"堿基而成，因此有更高的重組效率。pBLUE-T 載體插入位點(diǎn)兩端獨(dú)特設(shè)計(jì)的兩個(gè)EcoR I位點(diǎn)使插入片段可以用廉價(jià)高效的EcoR I單酶切檢測(cè)； 同時(shí)pBLUE-T 載體不含NdeI或NcoI限制性?xún)?nèi)切酶位點(diǎn)，可方便用于克隆含上述酶切位點(diǎn)的基因。此外，本公司載體連接體系還有背景低（藍(lán)斑小于10%），重組率高（白斑中超過(guò)90%有插入片段），可快速連接等特點(diǎn)。本說(shuō)明書(shū)末列出了pBLUE-T 載體相關(guān)的技術(shù)資料，其全序列可參照pBlueScript II SK(+)序列，只是其多克隆酶切位點(diǎn)處序列稍有不同。
■ 產(chǎn)品亮點(diǎn)
★實(shí)現(xiàn)5-10min快連，無(wú)需過(guò)夜
★需要藍(lán)白斑篩選
★藍(lán)斑率低于10%
★重組率高，克隆效率高達(dá)90%
★可5ul體系連接，連接效率不變
★適合Taq、Tth等系列產(chǎn)物的克隆
★可使用M13、T7、T3啟動(dòng)子引物測(cè)序
★多克隆位點(diǎn)豐富便于重組表達(dá)基因的亞克隆
■ 儲(chǔ)存
保存：-20℃至少保存1年。
■ pBLUE-T載體測(cè)序引物序列
M13F: TGTAAAACGACGGCCAGT
M13R: CAGGAAACAGCTATGACC
■ pBLUE-T載體圖譜
■ pBLUE-T載體多克隆位點(diǎn)序列
